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NOVO CIB的人腺苷激酶是一種活性且純化的 345-aa 短形式(14,2) ADK 蛋白（39kDa）通過 RT-PCR 擴增從人肝癌細胞中提取的 mRNA 進行克隆并在大腸桿菌中表達。克隆的 ADK 序列（GenBank 登錄號 U50196）通過 DNA 測序進行確認（ 同一性）。
腺苷激酶是核苷類似物激活的關(guān)鍵酶。
要快速評估人腺苷激酶新型核苷類似物的底物特性，請參閱我們的PRECICE � ADK 磷酸化檢測試劑盒。
ADK 也是藥物發(fā)現(xiàn)的經(jīng)過驗證的目標(biāo)：腺苷調(diào)節(jié)藥物已作為新的鎮(zhèn)痛和抗炎藥物 (4) 進行了廣泛測試 (1)，用于治療精神分裂癥 (7) 或限制缺血性中風(fēng)后的腦損傷 (8) 。
腺苷激酶是一種普遍存在的酶，可催化 γ-磷酸鹽從 ATP 轉(zhuǎn)移到腺苷 (AR) 的 5'-羥基，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能的重要調(diào)節(jié)劑，也是參與缺氧、炎癥和傷害感受的信號分子。腺苷激酶與腺苷脫氨酶一起調(diào)節(jié)細胞內(nèi)和細胞外的腺苷濃度。抑制腺苷激酶會導(dǎo)致局部腺苷濃度選擇性增加，并降低體內(nèi)癲癇發(fā)作易感性和傷害感受(3)。 ADK 功能障礙與多種病理有關(guān)，包括糖尿病(13)、癲癇(6)和癌癥。因此，ADK 成為藥物發(fā)現(xiàn)的合理治療靶點，腺苷調(diào)節(jié)藥物已被廣泛應(yīng)用。經(jīng)過測試(1)作為新的鎮(zhèn)痛和抗炎藥物(4)用于治療精神分裂癥(7)或限制缺血性中風(fēng)后的腦損傷(8)。
人類ADK的X射線晶體結(jié)構(gòu)已得到描述(9)，為合理設(shè)計和優(yōu)化新型ADK抑制劑提供了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。此外，該酶負責(zé)多種治療上有用的核苷的磷酸化和隨后的臨床活性，包括抗病藥物利巴韋林(10)、免疫抑制藥物咪唑立賓(11)和抗癌 C-核苷噻唑呋林(12)。
 單位定義： 1 個單位的腺苷激酶在 pH 8、37°C 下每分鐘將 1.0 µmole 肌苷和 ATP 轉(zhuǎn)化為 IMP 和 ADP，由耦合的 IMPDH 酶系統(tǒng)測量。 比活性： ≥ 0.200 單位/毫克蛋白質(zhì)。 純度：通過12% AA SDS-PAGE控制。 | 測定條件：腺苷激酶與特定核苷底物的酶活性通過在偶聯(lián)的乳酸脫氫酶/丙酮酸激酶系統(tǒng)中的分光光度測定來測量。測定在 37℃、50mM Tris-HCl pH7.6 下進行； 50mM KCl、5mM MgCl 2、2.5mM ATP、0.1mM NADH、1mM 磷酸烯醇丙酮酸、1mM DTT、PK 5U/ml、LDH 5U/ml。在 iEMS Reader MF (Labsystems) 微量滴定板讀數(shù)器中在 340 nm 處跟蹤反應(yīng)。核苷、核苷酸、LDH 和 PK 購自 Sigma-Aldrich。  |
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