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熒光染料是指吸收一定波長的光波并發(fā)射出比所吸收的光波長更大的另一種光波的物質(zhì)。它們大多是含有苯環(huán)或具有共軛雙鍵的雜環(huán)的化合物。熒光染料可以單獨(dú)使用，也可以組合成復(fù)合熒光染料。
熒光標(biāo)記是將熒光染料（熒光團(tuán)或熒光素）選擇性共價(jià)結(jié)合或物理吸附在待研究分子（蛋白質(zhì)、多肽等）的某一基團(tuán)上的方法。利用其熒光特性提供有關(guān)所研究物體的信息。
熒光染料由于靈敏度高、操作方便，已逐漸取代放射性同位素作為檢測標(biāo)記物，廣泛應(yīng)用于熒光免疫學(xué)、熒光探針、細(xì)胞染色等領(lǐng)域。包括特異性DNA染色，用于染色體分析、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡等相關(guān)研究。許多其他核酸染料是多色染色系統(tǒng)中有用的復(fù)染劑，可作為背景對(duì)照，標(biāo)記細(xì)胞核，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)的空間關(guān)系一目了然。
熒光標(biāo)記單克隆抗體技術(shù)為流式細(xì)胞術(shù)在細(xì)胞膜及細(xì)胞內(nèi)各種功能抗原、腫瘤基因蛋白等領(lǐng)域的研究拓展了無限的應(yīng)用空間。熒光探針可以通過蛋白質(zhì)交聯(lián)劑與單克隆抗體共價(jià)結(jié)合。免疫熒光標(biāo)記常用的染料是異硫氰酸熒光素 (FITC)、藻紅蛋白 (PE) 和 AlexaFluor 系列染料。
核酸熒光染料對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色，定量測定細(xì)胞發(fā)出的熒光強(qiáng)度，從而可以測定細(xì)胞核中DNA和RNA的含量，分析細(xì)胞周期和細(xì)胞增殖情況。有多種熒光染料可以對(duì)細(xì)胞中的 DNA 或 RNA 進(jìn)行染色。常用的DNA染料有碘化丙啶（PI）、DAPI、Hoechst 33342等，RNA染料有噻唑橙、吖啶橙等。
APDye Fluor 647（Alexa Fluor 647 等效物；AF647）是一種明亮的綠色熒光染料，適合與 633、650 nm 氬激光配合使用。該染料是水溶性的，并且在 pH 4 至 pH 10 范圍內(nèi)對(duì) pH 值不敏感。該染料具有 4 個(gè)磺酸鹽基團(tuán)，使其水溶性高，在水溶液中聚集較少。 APDye Fluor 647 用于蛋白質(zhì)和抗體標(biāo)記，或高標(biāo)記密度的核酸應(yīng)用。您可能對(duì)Alexa 647 nhs 酯感興趣，點(diǎn)擊了解更多信息。
APDye Fluor 647 在結(jié)構(gòu)上與 Alexa Fluor 647 相似，并且光譜與 Cy5 Dye、Alexa Fluor 647、CF 647 Dye 或任何其他基于 Cyanine5 的熒光染料幾乎相同。
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