OptiVitro® T細胞無血清培養基介紹

更新時間：2023-09-08 點擊次數：1620

OptiVitro® T細胞無血清培養基

? 無血清，無異種成分，無外源生長因子
? 支持T細胞的快速增殖和高密度培養，可用于大規模工藝流程
? 提供瓶裝&袋裝兩種形式，便于生產規模擴大和商業化開發
? 適合于多種激活方法，可支持較長周期的穩定培養（＞14天）
? 自主研發，供貨穩定，可提供定制化服務（配方優化等）
? 按照GMP標準生產和管理，完成FDA DMF備案

應用：適合用于擴增人外周血單個核細胞（PBMC）中的 T 細胞，也適合于 T 細胞的重激活擴增培養。應用于T細胞療法開發，如CAR-T、TCR-T、TIL等。

常見問題
1. 組分：
本產品每1L基礎培養基配發8mL添加組分，添加組分不是ICSR或者血替，化學成分明確，可放心使用，必須配成全培養基后再使用；——可以提供成分說明及TSE/BSE的申明。
2. T細胞激活方式：
使用本產品，可根據說明書用抗體包板方式進行激活，也可購買商業抗體偶聯磁珠進行激活，本產品同樣支持磁珠激活。
3. 活率：
直接培養PBMC，D5后活率可達90%以上，從PBMC中分選出T細胞，則D3開始活率可達到90%以上，D7后活率均可達到95%以上；如果轉導CAR，轉導當天活率顯著下降，為正常現象，繼續培養活率會持續上升。
4. 培養方式：
使用本產品，比較推薦的培養方式是D0天激活，D3、D5、D7補充培養液將細胞密度調整到0.5-1x10^6cells/ml,D7后可選擇2天或3天補一次液。
5. T細胞擴增速度：
T細胞的擴增在D3-D9速度較快，基本平穩，D9細胞擴增倍數一般可以達到200倍以上。D9后細胞擴增速度逐漸減緩，激活PBMC中的T細胞，最多可培養20天。
6. 高密度培養：
靜置培養，密度可達5-6x10^6 cells/ml，搖瓶培養或其他震蕩培養方式，密度可達10x10^6 cells/ml以上。
7. CD4/CD8比例調節：
使用本產品并且用磁珠激活，CD4比例較高，用抗體包板激活則CD8比例較高，可以通過改變激活方式、改變抗體包板濃度，調節CD4/CD8比例。
8. T細胞亞型分群：
Tn為初始T細胞，Tcm為中央記憶型T細胞，Tem為激活的Tcm，Tef為效應T細胞，分群比例隨著細胞培養的時間而變化。不同客戶對分群的要求可能不同，且不同激活方式、細胞因子的選擇以及濃度，對分群影響很大，建議客戶自行測試。
9. T細胞轉導：
根據客戶反饋測試數據，本產品陽性率可達到50%左右，但是不同客戶使用的工藝不同，可能導致陽性率有變化。CAR慢病毒轉導，可使用polybrene輔助轉導，逆轉錄病毒轉導可使用retronectin輔助轉導，也有許多新型輔助因子可提高轉導效率；采用離心轉導的方式可提高轉導效率。
10. T細胞生物反應器培養：
靜置培養后D5-D7開始在反應器中培養，在達到目標體積之前，可以2-3天補液細胞密度調整到0.5-1x10^6 cells/ml，到達目標體積后可以采取部分灌流策略。