neuvitro纖連蛋白涂層方案

更新時間：2024-03-11 點擊次數：1448

Neuvitro公司提供專業涂層，覆蓋廣泛的基材，如PDL、PLL、PLO、膠原蛋白、明膠、層粘連蛋白、纖連蛋白、PDL+層粘連蛋白、PDL+纖連蛋白、PLO+層粘連蛋白、PLO+纖連蛋白、PDL +層粘連蛋白+纖連蛋白等。Electron Microscopy Science、ThermoFisher Scientific 和 VWR 提供的大多數帶涂層德國蓋玻片實際上是由 Neuvitro Corporation 制造的。

纖連蛋白是細胞外基質 (ECM) 的糖蛋白之一，可與跨膜受體和其他細胞外基質成分（如膠原蛋白、纖維蛋白、多聚糖等）結合。纖連蛋白在細胞粘附、生長、遷移和分化中發揮重要作用。它對于其他過程也很重要，例如傷口愈合和胚胎發育。

Sigma 的纖連蛋白涂層方案

必須針對每種細胞系和應用確定最佳貼壁條件。

用 0.5 mL 無菌水重新配制。不要攪動。讓溶液靜置 30 分鐘以溶解。可能會殘留少量未溶解的物質。這不會影響產品性能。
在無菌平衡鹽溶液中稀釋纖連蛋白，并以最小體積包被培養物表面。
在室溫下風干至少 45 分鐘。多余的纖連蛋白可以通過抽吸去除，但這不是必需的。

ABIF 的纖連蛋白涂層方案

庫存纖連蛋白（Sigma F-0895，來自人血漿的 1 mg/ml 纖連蛋白）應分裝冷凍（-80oC），可在大約一個月內使用。在冰箱中大約一個月后，蛋白質會降解，細胞不再能很好地擴散。
對于 MEF 或 3T3 細胞，用 PBS++ 將 1mg/ml 纖連蛋白原液稀釋至 1 µg/ml；對于 CHO 細胞，稀釋至 2 µg/ml。（1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS）
將 1 ml 纖連蛋白溶液放在玻璃底皿的蓋玻片上，并在冰箱中放置過夜。
用 PBS（含或不含鈣和鎂）沖洗 3 次，并置于冰箱中，兩周內使用

Jacobs 的纖連蛋白涂層方案

程序

第 1 天（約 1 小時，等待 1 小時）

載玻片準備
將載玻片浸泡在 100% EtOH 中至少五分鐘（通常 20 分鐘是比較好的流動時間）。
在引擎蓋中打開 20 個培養皿。
將載玻片和乙醇放入通風柜中。
用同樣的 100% 乙醇對平頭鉗進行消毒。
將載玻片傾斜在培養皿邊緣晾干（面朝上）
將載玻片全部放下后翻轉，以便另一面可以干燥，并且蓋子上聚集的任何乙醇都可以干燥。
一旦所有乙醇蒸發（載玻片上不應有潮濕發亮的地方），將載玻片平放在培養皿底部。
將蓋子蓋在盤子上。

纖連蛋白溶液

每 1 mL PBS 溶液 (1:100) 制備 10 ul 纖連蛋白。每張載玻片需要 1 mL 的溶液。

纖連蛋白溶液的體積 = [載玻片數量] x 1 ml/載玻片

4°C 下可保存長達 6 個月
對于 20 張載玻片，這意味著將 200 ul 纖連蛋白加入到 19.8 ml PBS 中。
攪拌均勻。

涂層

小心地將 1 ml 纖連蛋白溶液移至每個載玻片頂部。這是一個微妙的過程，要小心，慢慢來
不要讓溶液掉落到載玻片的邊緣。如果發生這種情況，您需要收集液體，對載玻片進行消毒，干燥并重試。任何從側面落下的液體都會將剩余的液體吸出并吸到載玻片下方，這是我們不希望的。
確保溶液覆蓋整個幻燈片。您可以使用無菌移液器吸頭將液體涂抹到任何裸露的點上。表面張力將使液體留在載玻片上，但不要將其推到側面。
蓋上玻片并讓玻片在細胞培養罩中于室溫下不受干擾地靜置 1 小時。
平板細胞

GG-12-fibronectin：直徑12毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $88.65

GG-12-1.5-fibronectin：直徑12毫米，#1.5厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $98.65

GG-14-fibronectin：直徑14毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $93.65

GG-15-fibronectin：直徑15毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $98.65

GG-18-fibronectin：直徑18毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $113.65

GG-18-1.5-fibronectin：直徑18毫米，#1.5厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $123.65

GG-20-fibronectin：直徑20毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $120.65

GG-22-fibronectin：直徑22毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $124.65

GG-22-1.5-fibronectin：直徑22毫米，#1.5厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可立即使用 $134.65

GG-24-fibronectin：直徑24毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $134.65

GG-25-fibronectin：直徑25毫米，#1厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每袋密封15片，已滅菌，可立即使用 $144.65

GG-25-1.5-fibronectin：直徑25毫米，#1.5厚度，60片CE認證晶瑩剔透的德國玻璃蓋玻片，兩面涂有聚-D-賴氨酸+纖連蛋白涂層，用于細胞培養和共聚焦熒光顯微鏡，每片密封15片袋子，已消毒，可供使用 $174.65

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neuvitro纖連蛋白涂層方案

Sigma 的纖連蛋白涂層方案

ABIF 的纖連蛋白涂層方案

庫存纖連蛋白（Sigma F-0895，來自人血漿的 1 mg/ml 纖連蛋白）應分裝冷凍（-80oC），可在大約一個月內使用。在冰箱中大約一個月后，蛋白質會降解，細胞不再能很好地擴散。

對于 MEF 或 3T3 細胞，用 PBS++ 將 1mg/ml 纖連蛋白原液稀釋至 1 µg/ml；對于 CHO 細胞，稀釋至 2 µg/ml。 （1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS）

將 1 ml 纖連蛋白溶液放在玻璃底皿的蓋玻片上，并在冰箱中放置過夜。

用 PBS（含或不含鈣和鎂）沖洗 3 次，并置于冰箱中，兩周內使用

Jacobs 的纖連蛋白涂層方案

程序

第 1 天（約 1 小時，等待 1 小時）

纖連蛋白溶液

涂層

對于 MEF 或 3T3 細胞，用 PBS++ 將 1mg/ml 纖連蛋白原液稀釋至 1 µg/ml；對于 CHO 細胞，稀釋至 2 µg/ml。（1 µl/ml PBS 或 2 µl/ml PBS）