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用甲醛固定后，染色部分保留。 LumiTracker ER Green 和 LumiTracker ER Red 不適合對固定后的細胞進行染色。
注意：格列本脲的藥理活性可能會影響 ER 功能。某些特殊細胞類型中磺脲類受體的可變表達可能會導致非 ER 標記。
將 50 μg LumiTracker ER Green 溶解在 64 μL DMSO 中，以獲得 1 mM 儲備溶液。
將 50 μg LumiTracker ER Red 溶解在 55 μL DMSO 中，以獲得 1 mM 儲備溶液。
注意：我們建議將儲備溶液儲存在?20°C或?80°C避光條件下。避免反復凍融循環。
用鈣和鎂 (HBSS/Ca/Mg) 在 Hank's 平衡鹽溶液中稀釋 LumiTracker ER 染色劑的儲備溶液，以獲得工作溶液。使用 100 nM 至 1 μM 的濃度。 LumiTracker ER 染色劑的稀釋度取決于細胞類型和密度，應通過實驗確定。
1000 g離心細胞懸液 3-5 分鐘；棄去上清液。
用預熱的 HBSS 在 37°C 下清洗細胞兩次，每次 5 分鐘。
推薦的細胞密度為1×10 6 個細胞/mL。
將 1 mL 預熱的 LumiTracker ER 工作溶液添加到管中，并在 37 °C 和 5% CO 2下孵育細胞 15-30 分鐘。
室溫下以 400 g離心細胞 3-4 分鐘；棄去上清液。
用培養基清洗染色細胞兩次。
用無血清細胞培養基或 PBS 重懸細胞。
通過流式細胞儀分析細胞。
對于熒光顯微鏡，將一滴染色的細胞懸浮液轉移到載玻片上。用蓋玻片蓋住細胞。
在無菌蓋玻片上培養細胞。
貼壁細胞可以直接在蓋玻片上染色。
從蓋玻片中吸出介質。
用 37°C 預熱的 HBSS 沖洗細胞。
加入 100 μL 預熱的 LumiTracker ER 工作溶液，輕輕搖動以全覆蓋細胞。在 37 °C 和 5% CO 2下孵育細胞 15-30 分鐘。
用培養基清洗染色細胞兩次。
如果通過流式細胞術檢測，則需要在染色前重懸細胞。
對于熒光顯微鏡，將帶有染色細胞的蓋玻片翻轉到載玻片上，將它們放置在載玻片和蓋玻片之間。
如果要固定染色的細胞，請在 4% 甲醛中于 4 °C 下孵育 2 分鐘。
固定細胞用 PBS 清洗兩次，每次 5 分鐘。
使用封固劑將細胞封固在蓋玻片下 。
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