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SPEED Biosystems 擁有一系列核酸凝膠染料，包括用于凝膠前和凝膠后染色的 GreenView™、GreenView™ Plus、GreenView™ Ultra 和 RedView™，以及用于電泳前與核酸混合的 SafeGreen™ 和 SafeRed™ 上樣染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料，旨在替代高致突變性溴化乙錠 （EB）。這些染料兼具高靈敏度、低毒性和高穩(wěn)定性，優(yōu)于 EB。EB 因其成本低且通常具有足夠的靈敏度而被廣泛用于核酸凝膠染色。然而，EB 具有高度誘變性。與凈化和廢物處理相關(guān)的安全隱患和成本最終會使染料變得昂貴且使用不便。
優(yōu)勢
★ 比 EB 更安全。Ames 試驗和其他試驗顯示無突變性和無細(xì)胞毒性。
★ 常溫下穩(wěn)定。
★ 與標(biāo)準(zhǔn)藍(lán)光 LED 和 UV 透射儀兼容。
★ 與藍(lán)光一起使用可減少凝膠切除和后續(xù)克隆的誘變。
圖 1.使用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的凝膠染色結(jié)果（左圖），以及使用 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 的比較結(jié)果（右圖）。左圖：將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)（NEB，貨號 # N0468S）的兩倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分分 3 個泳道上加載到每塊凝膠上，然后用 GreenView™、GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 進(jìn)行后染色。右圖：結(jié)果顯示 GreenView™ 與 SYBR Safe™ 和 GelGreen™ 具有相似的靈敏度，GreenView™ Plus 和 GreenView™ Ultra 的靈敏度要好得多。
圖 2.使用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行凝膠染色結(jié)果。將 1 kb DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)品的 2 倍梯度稀釋液以 25 ng、50 ng 和 100 ng（從左到右）的量分裝到 3 個泳道的每塊凝膠上，然后分別用 RedView™ 和 GelRed™ 進(jìn)行后染色。結(jié)果顯示 RedView™ 與 GelRed™ 具有相似的靈敏度。
除了比 EB 更安全之外，與 SYBR Safe DNA 凝膠染料相比，GreenView™、GreenView™ Plus 和 RedView™ 的細(xì)胞通透性降低，使其更安全（圖 3）。
圖 3.使用 SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 進(jìn)行細(xì)胞通透性測試。Hela 細(xì)胞在 37？使用 1X SYBR Safe、GreenView、GreenView Plus 和 RedView 30 分鐘。
GreenView Plus 和 RedView 無法穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA，并且比 SYBR Safe 安全得多，后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對細(xì)胞核進(jìn)行染色。
GreenView | GreenView Plus | GreenView Ultra | RedView | |
SKU | LYF1001 | LYF1002 | LYF1003 | LYF1004 |
Ex/Em (nm) | 488/530 | 488/530 | 488/530 | 488/530 |
Nonhazardous/ | √ | √ | √ | √ |
Gel electrophoresis | √ | √ | √ | √ |
dsDNA | √ | √ | √ | √ |
ssDNA | √ | √ | ||
RNA | √ | √ | ||
Precast gel staining | √ | √ | √ | |
Post-gel staining | √ | |||
Gel band excision for cloning | √ | √ | √ | |
Excitation Source | Blue light/UV | Blue light/UV | Blue light/UV | UV |
Recommended emission filter | SYBR filter | SYBR filter | SYBR filter | EB filter |
優(yōu)勢
★ 在 6X 上樣緩沖液中配制，即用型。
★ 安全無毒，是 EB 的替代品。
圖 4.使用 SafeGreen™（左圖）和 SafeRed™（右）與 DNA 分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)混合的凝膠染色結(jié)果。
SafeGreen™ 和 SafeRed™ 經(jīng)過專門設(shè)計，不滲透細(xì)胞膜，從而通過防止染料進(jìn)入活細(xì)胞來降低遺傳毒性（圖 5）
圖 5.使用 SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 進(jìn)行細(xì)胞通透性檢測。將 Hela 細(xì)胞在 37oC 下與 1X SYBR Safe™、SafeGreen™ 和 SafeRed™ 一起孵育 30 分鐘。SafeGreen™ 和 SafeRed™ 無法穿透細(xì)胞膜結(jié)合活細(xì)胞中的 DNA，比 SYBR Safe™ 安全得多，后者可快速進(jìn)入細(xì)胞并對細(xì)胞核進(jìn)行染色。
相關(guān)產(chǎn)品
GreenView™ DNA Gel Stain 貨號 LYF1001
GreenView™ Plus DNA Gel Stain 貨號 LYF1002
GreenView™ Ultra DNA Gel Stain 貨號 LYF1003
RedView™ DNA Gel Stain 貨號 LYF1004
SafeGreen™ Loading Dye 貨號 LYF1005
SafeRed™ Loading Dye 貨號 LYF1006
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