當(dāng)前位置：在 600 nm 處測(cè)量光密度 （OD） 是確定細(xì)菌或酵母培養(yǎng)物密度的常用分光光度法，通常在細(xì)菌或酵母生長(zhǎng)階段。OD600 測(cè)量是一種快速便捷的測(cè)定細(xì)胞密度的方法，這些細(xì)胞通常是單細(xì)胞的、太小且運(yùn)動(dòng)的，無(wú)法使用典型的基于圖像的顯微方法進(jìn)行計(jì)數(shù)。
可以建立與特定細(xì)胞類型的預(yù)期密度相匹配的目標(biāo) OD 600 值，以簡(jiǎn)化相同樣品類型的未來(lái)測(cè)量。這是微生物實(shí)驗(yàn)室在細(xì)胞生長(zhǎng)的各個(gè)階段檢查和維護(hù)樣品的一種簡(jiǎn)單方法，包括細(xì)胞周期的滯后期、對(duì)數(shù)期（也稱為指數(shù)期）和穩(wěn)定期。
了解 OD 測(cè)量的當(dāng)前限制
雖然分光光度計(jì)是進(jìn)行這種測(cè)量的好工具，但 OD 實(shí)際上是光散射的量度，而不是真實(shí)吸光度的量度。因此，測(cè)得的 OD 受細(xì)胞類型的大小和形狀、樣品活力或生長(zhǎng)期、分光光度計(jì)的光學(xué)配置以及光譜儀的線性范圍等因素的影響。
為了考慮影響測(cè)量 OD 的因素，建議根據(jù)生長(zhǎng)曲線憑經(jīng)驗(yàn)確定目標(biāo) OD 600 值。通過(guò)將測(cè)得的 OD 600 值與每種細(xì)胞類型的集落形成單位 （CFU） 板計(jì)數(shù)相關(guān)聯(lián)來(lái)創(chuàng)建生長(zhǎng)曲線。
一旦建立了生長(zhǎng)曲線并確定了細(xì)胞類型的目標(biāo) OD，就可以使用測(cè)量模式或分光光度計(jì)之間的轉(zhuǎn)換因子來(lái)使用不同的光學(xué)配置。例如，DS-11 系列分光光度計(jì)超微量模式采用與 DS-11 系列比色皿模式不同的光學(xué)配置，因此在兩種模式下測(cè)量的樣品將檢測(cè)不同的光散射。
在這種情況下以及使用不同品牌或型號(hào)的分光光度計(jì)時(shí)，轉(zhuǎn)換因子很有用。該系數(shù)的計(jì)算方式如下所示：
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