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簡要描述：ATP含量試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實驗室產(chǎn)品
產(chǎn)品型號：廠商性質(zhì)：代理商更新時間：2024-04-26訪 問 量：733相關(guān)文章
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
ATP含量試劑盒
ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測定ATP含量并且計算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。
測定原理：
肌酸激酶催化肌酸和ATP反應生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測磷酸肌酸含量，以此反應ATP含量。
自備儀器和用品：
分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑組成和配制：
酸性提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；
堿性提取液：液體60mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：粉劑×1支，4℃保存；臨用前加入1mL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑二：液體1.5mL×1支，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入500μL蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。
試劑四：液體5mL×1瓶，4℃保存；
試劑五：液體25mL×1瓶，4℃保存；
標準液：液體10mL×1瓶，2μmol/mLATP標準液，4℃保存；
ATP提取：
1、血清（漿）中ATP的提取：按照血清（漿）體積（mL）：酸性提取液體積（mL）為1：5~10的比例（建議取約0.1mL血清（漿），加入1mL酸性提取液），進行冰浴勻漿，8000g 4 ℃離心10min；取上清液至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質(zhì)含量測定）。
2、組織中ATP的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL酸性提取液），進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質(zhì)含量測定）。
3、細胞或細菌中ATP的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL酸性提取液），超聲波破碎1min（冰浴，強度20％或200W，超聲2s，停1s），8000g 4 ℃離心10min；取上清液至另一EP管中，加入等體積的堿性提取液使之中和，混勻，8000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測（不可用于蛋白質(zhì)含量測定）。
測定步驟：
1、分光光度計或酶標儀預熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長到700nm，蒸餾水調(diào)零。
2、顯色劑的配制：臨用前請根據(jù)擬用顯色劑體積（樣本數(shù)×0.2 m L），按試劑四(mL)：試劑五（mL）=1：5的比例配制。用多少配多少。
3、樣本測定：
試劑名稱(μL) | 測定管 | 對照管 | 標準管 | 空白管 |
樣本 | 10 | 10 | ||
標準液 | 10 | 10 | ||
試劑一 | 20 | 20 | ||
試劑二 | 10 | 10 | 10 | 10 |
試劑三 | 10 | 10 | ||
蒸餾水 | 30 | 30 |
充分混勻，37℃準確水浴30min
顯色劑 | 200 | 200 | 200 | 200 |
37℃水浴20min后，700nm下測定各管吸光值
注意：空白管和標準管通常只需要各做一個。每個測定管設一個對照管。
ATP含量計算：
1、血清（漿）中ATP含量計算
ATP含量(μmol/mL)=[C標準管×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=40×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管)
2、組織、細菌或細胞中ATP含量計算
（1）按蛋白濃度計算
ATP含量(μmol/mg prot)=[C標準管×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管) ×V1]÷(V1÷Cpr）=2×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管)÷Cpr
蛋白質(zhì)含量需要另外測定。
（2）按樣本鮮重計算
ATP含量(μmol/g鮮重)=[C標準管×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=4×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管)÷W
（3）按細菌或細胞密度計算
ATP含量(μmol/104 cell）=[C標準管×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.008×(A測定管－A對照管)÷(A標準管－A空白管)
C標準管：標準液濃度，2μmol/mL；V1：加入反應體系中樣本體積，0.01mL；V2：加入提取液體積，2mL；V3：加入血清（漿）體積：0.1mL；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL； W：樣本質(zhì)量，g；500：細胞或細菌總數(shù)，500萬。
注意：*低檢測限為10nmol/mL或10nmol/g鮮重或0.1nmol/mg prot
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國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
國外試劑的訂購。可提供歐美實驗室品牌的采購方案。
提供加急物流處理，進口貨物，最快交期1-2周。
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公司代理眾多有名生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重點合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。
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公司突出創(chuàng)新思維，提高工作效能，減低運作成本，為客戶提供優(yōu)惠的價格。
ATP含量試劑盒
中文名稱：甲泛葡胺
英文名稱：Metrizamide
分子式：C18H22I3N3O8
分子量：789.1
CAS號：31112-62-6
級別：Reagent Grade
EINECS編號：250-475-5
儲存條件：2～8℃
中文別名：甲泛葡胺、阿米派克、甲泛影酰胺、室椎影
英文別名：2-((3-(acetylamino)-5-(acetylmethylamino)-2,4,6-triiodobenzoyl)amino)-2-deox、2-(3-ace***ido-2,4,6-triiodo-5-(n-methylace***ido)benzamido)-2-deoxy-d-gluco
是否危險：否
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