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簡(jiǎn)要描述：乙醛脫氫酶（ALDH）測(cè)試盒 乙醛脫氫酶（acetaldehyde dehydrogenase，ALDH）試劑盒 上海牧榮生物科技有限公司專業(yè)實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品.為客戶全面解決實(shí)驗(yàn)、生產(chǎn)、開發(fā)需求,提供方便、快捷的服務(wù)。
產(chǎn)品型號(hào)：廠商性質(zhì)：代理商更新時(shí)間：2024-05-06訪 問 量：626相關(guān)文章
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| 品牌 | 其他品牌 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
乙醛脫氫酶（ALDH）測(cè)試盒
注意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動(dòng)物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化，所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時(shí)，乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。
測(cè)定原理
在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm處的吸光值會(huì)增加，測(cè)定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。
試劑組成和配制
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：液體6mL×1瓶，4℃保存。
試劑二：液體2mL×1瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體1mL×1支，4℃避光保存。
試劑四：液體1mL×1支，4℃保存。
試劑五：液體1mL×1支，4℃保存。
ALDH提取
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進(jìn)行冰浴勻漿，然后10000g，4℃，離心20min。
細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
液體：直接檢測(cè)。
測(cè)定操作表
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長至340nm。
操作表
對(duì)照管 | 測(cè)定管 | |
樣本（µL） | 40 | |
試劑一（µL） | 60 | 60 |
試劑二（µL） | 20 | 20 |
試劑三（µL） | 10 | 10 |
試劑四（µL） | 10 | 10 |
試劑五（µL） | 10 | 10 |
H2O（µL） | 90 | 50 |
充分混勻，37℃，微量石英比色皿/96孔板，對(duì)照管調(diào)零，于340nm處測(cè)定0s與60s的吸光值A(chǔ)1和A2，△A= A2-A1。 | ||
ALDH酶活計(jì)算
用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/mg prot）= 
×V反總÷（V樣×Cpr）÷T = 804×△A÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T= 804×△A÷W
（3）按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)））÷T= 804×△A÷細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)）
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：每mL樣本每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 804×△A
：NADH微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：比色皿光徑，1cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
b．用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
（1）按蛋白濃度計(jì)算
酶活定義：每毫克蛋白每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/mg prot）= ×V反總÷（V樣×Crp）÷T = 1608×△A÷Cpr
（2）按樣本質(zhì)量計(jì)算
酶活定義：每克樣品每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/g 鮮重）= ×V反總÷（V樣×W÷V樣總）÷T = 1608×△A÷W
（3）按照細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
酶活定義：每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/104cell）= ×V反總÷（V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量（萬個(gè)））÷T= 1608×△A÷細(xì)胞數(shù)量
（4）按液體體積計(jì)算
酶活定義：每mL樣本每分鐘催化還原1nmol NAD+的酶量為1個(gè)酶活單位。
ALDH酶活（nmol/min/mL）= ×V反總÷V樣÷T= 1608×△A
：NADH微摩爾消光系數(shù)，6.22×10-3 L/µmol/cm；d：96孔板光徑，0.5cm；V反總：反應(yīng)體系總體積，0.2mL；V樣：反應(yīng)體系中樣本體積，0.04mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g
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國內(nèi)試劑耗材經(jīng)銷代理。
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