| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | K003 |
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| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業,制藥/生物制藥 |
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laebio：Human Topoisomerase I Drug Screen Kit 貨號：K003
描述:
該檢測試劑盒包含用于藥物篩選目的的I型拓撲異構酶活性常規檢測的試劑。人拓撲異構酶I (topoI)是喜樹堿和其他“拓撲異構酶I毒物"的細胞內靶標，其中一些是迄今為止鑒定的很有希望的抗癌藥物。Topo I藥物篩選試劑盒具有巨大的價值，因為它將能夠合理篩選新的抗癌化合物，有朝一日可能用于減輕被診斷患有癌癥的人的痛苦。包括DNA標記以允許清楚地檢測酶。該檢測對拓撲異構酶I具有特異性。強烈建議將活性人拓撲異構酶I(目錄號P005)與該試劑盒一起使用。
應用:
- 體外研究超螺旋對轉錄的影響。
- 體外研究染色質重建。
- 確定自然發生的DNA的超螺旋程度。
- 檢測長度僅相差一個堿基對的突變質粒。
- 通過解螺旋DNA以暴露限制性位點來增加抗性DNA底物的限制性內切酶消化。
- 抗癌藥篩選。
質量控制測試:
- 通過分析線性KDNA和線性質粒DNA的形成來進行核酸酶污染的測試。用KDNA或超螺旋pGEM 5Z DNA孵育(4 hrs. at 37oC in the presence of 10 mM MgCl2)被執行。在這些條件下不會產生線性DNA或分解產物。
- Topo II交叉污染檢查為陰性。在topo II反應條件下，KDNA不能脫去。
套件內容:
- 超螺旋質粒底物DNA對照(目錄號D001，
100微升
LAE1DNA，0.2微克/微升，適用于100次標準檢測)。 - 松弛的質粒DNA標記物(cat# D002，100 ul預松弛的pLAE1 DNA，由Topo I以0.04 ug/ul的濃度在凝膠加載緩沖液中制備，適用于20種標準分析)。
- 5X Topo I反應緩沖液(目錄號B001，500微升，適用于100種標準檢測)。
- Topo I停止緩沖液/凝膠加載染料(目錄號B002，500微升，適用于100種標準檢測)。
- 對照抑制劑(目錄# B003，喜樹堿；凍干)。
檢測條件:
- 建議在最終體積為10微升的Topo I反應緩沖液(40 mM Tris-Cl，pH 7.5，100 mM NaCl或KCl，10mM MgCl)中使用5單位的Topo I活性物質(目錄號P005)進行松弛試驗
2
、0.5 mM EDTA、30微克/毫升BSA)。 - 標準分析:超螺旋質粒DNA(目錄號D001)以0.2微克/反應使用。用5微升(在10微升反應體積中)終止緩沖液(5% sarkosyl，0.0025%溴酚藍，25%甘油)終止反應。然后可以在0.8%天然瓊脂糖凝膠上分析反應產物。
- 每個泳道加載5 ul (0.2 ug)松弛的質粒DNA標記(目錄號D002)作為對照。
運輸/儲存:
該套件在環境溫度下運輸，應在-20℃下儲存oC.
僅供研究使用。
一個單位的topo I與0.2微克pGEM 5Z DNA在37℃孵育30分鐘oC.
上海牧榮生物科技有限公司
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laebio：Human Topoisomerase I Drug Screen Kit 貨號：K003
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