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人結直腸腺癌細胞(HCT-15)HCT-15細胞從一名男性Dukes C結直腸癌患者的大腸中分離出來。
【細胞名稱】人結直腸腺癌細胞
【細胞別名】HCT-15;HCT15
【種屬來源】人
【組織來源】結直腸腺癌
【細胞形態】上皮細胞樣
【生長特性】貼壁生長
【培養體系】1640+10%FBS+1%P/S
【傳代比例】1:3-1:4，每周換液2-3 次
【培養條件】氣相：95%空氣+5%二氧化碳，溫度：37℃
【凍存條件】凍存液：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO；存儲條件：液氮
【安全性】建議在二級生物安全臺內操作，并做好個人防護。
【用途】僅供科研使用
二、復蘇及傳代方法
1、細胞株的復蘇（凍存管）
（1）將凍存管在37℃水浴鍋中迅速全融化，并適當輕輕搖晃促融。快速、全融化可以提高細胞的復蘇效果。
（2）打開凍存管前時用75%酒精擦拭細胞凍存管外壁。
（3）將全融化的細胞直接離心，或者轉移至無菌15ml或其它合適無菌離心管中，400g離心5min，吸除上清，注意不要吸走細胞沉淀，然后用新鮮*全培養液重懸后轉移至培養器皿，混勻，置于CO2培養箱37℃培養。
（4）第二天視貼壁或生長狀態，更換培養液。
注意：如果收到的凍存管不能及時進行復蘇，還請置于-80℃或液氮中進行暫存，并盡快復蘇進行培養。
2、細胞株的復蘇（T25瓶）
（1）將收到T25瓶脫外包后用75%酒精擦拭瓶外壁。
（2）置于倒置顯微鏡下觀察細胞狀態，看是否有異常；無異常后，采用移液器移去多余的培養液，置于CO2培養箱37℃培養過夜。
（3）第二天視貼壁或生長狀態，考慮進行換液或傳代，傳代比例參考1:2~1:4。
三、注意事項
1、每支凍存管約含1×106個細胞，體積為1ml，預期存活率60-90%，建議復蘇至1個T25瓶或1個6cm培養皿中。如果復蘇后存活率較低，可以消化后轉移至3.5cm培養皿/T12.5瓶中，這樣細胞生長會更好。
2、如果本產品是常溫運輸，并且是培養瓶中充滿*全培養液的貼壁細胞，收到細胞后：
（1）及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象。
（2）用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。先不要打開培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2~4小時，以便穩定細胞狀態。
（3）仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息。
（4）靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態。
3、如果細胞密度超過85%請盡快進行傳代操作；如果懸浮的細胞較多，請將培養瓶置于培養箱中靜置過夜以使懸浮的細胞再次貼壁。如果收到的是常溫運輸的離心管裝的懸浮細胞，可以直接取出轉移至培養皿或培養瓶中培養。若培養液顏色正常則保留培養液繼續培養，并且在*次更換培養液時，保留一半原培養液，并加入一半新鮮培養液，這樣可以盡量避免由于培養液或血清差異導致細胞生長的不適應，確保細胞良好的生長狀態。
4、細胞培養請在生物安全柜臺中進行操作，并嚴格遵守無菌操作。
上海牧榮生物科技有限公司
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